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TransAM® 试剂盒是一系列灵敏性高、基于非放射性ELISA的转录因子活性测定试剂盒，有助于研究哺乳动物组织和细胞提取物中的转录因子激活度。此系列试剂盒可用于许多不同的转录因子，具体可测转录因子列表请见下表。
TransAM 转录因子ELISA工作原理简介
TransAM是测定转录因子与一致性结合位点结合的理想方案。TransAM试剂盒包含96孔板，该板上已固定了一致性结合位点寡聚核苷酸。将活化的核提取物添加到每个孔中，感兴趣的转录因子与寡核苷酸特异性结合。然后添加对转录因子的结合和活性形态的表位具有特异性的一级抗体，随后与二级抗体和显影溶液孵育，以提供定量、灵敏的比色读数（图1）。
图1: TransAM实验流程图
细胞提取物中活化的转录因子与固定在孔中的寡聚核苷酸上的一致性结合位点结合。与所提供的一级和二级抗体一起孵育可具体量化激活的转录因子。
TransAM转录因子ELISAs的优势
以往转录因子研究一直使用EMSAs/凝胶迁移实验、蛋白质印迹和基于报告基因的质粒转染试验进行，这些试验都很耗时，且通量不高，只能提供半定量结果。
TransAM测定的灵敏度比凝胶迁移实验高100倍，可在5小时内完成。TransAM试验是一种基于非放射性ELISA的试验，使其更容易进行。高通量96孔板允许同时筛选多达96个样本。而基于报告基因的质粒转染试验需要构建稳定的细胞系，且受转染效率的影响，耗时且通量低。所以TranAM避免了这些问题，使获得准确的转录因子激活度更加简单。
为什么选择TransAM？
- 灵敏性：比EMSA灵敏度高100倍
- 方便性：无需使用放射性物质和电泳凝胶
- 快速性：不到5小时就能获得结果
- 易分析性：允许在450nm下使用分光光度法进行比色读数进行简单的定量分析
- 规格灵活性：96孔检测板可实现高通量和低通量的多样选择
TransAM已被引用超过1000次
有关具体TransAM试剂盒的更多信息，或要了解有关每个试剂盒的使用方法和引用记录的信息，请单击下表中您感兴趣的转录因子靶标。
| Available Transcription Factor Assays | |
|---|---|
| AP-1 | ATF-2 |
| c-Myc | C/EBP α/β |
| CREB & pCREB | ER |
| FKHR (FOXO1) | HIF-1 |
| IRF-3 | MAPK Family |
| NFATc1 | NFκB |
| Nrf2 | p53 |
| PPARγ | STAT3 |
| T-bet | |
EAT涵盖的技术已申请专利，并授权给ActiveMotif。TransAM在NFκB相关药物发现中的使用已被涵盖在美国专利号6150090中，并需要Ariad Pharmaceuticals（美国马萨诸塞州剑桥）的许可。
